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蛋白纯化后沉淀了怎么办

时间:2024-04-23 21:01:48

内容一:

1.我们建议如果用镍柱来纯化蛋白的时候,纯化的过程纯化之后的溶液当中适当的加一点EDTA,让它螯合脱落下来的镍离子,减少重金属对蛋白的伤害;

2.我们可以加点分散剂,避免蛋白质分子接触碰撞,减少它的聚集,这些分散剂,比如说甘油,聚乙二醇,甘露醇,还有这个山梨醇之类的

3.我这个蛋白的话允许你加入一些辅助性的保护蛋白的话,那是最好比如说这个白蛋白,

内容二:

1. 蛋白本身容易絮凝,如果是这样,可添加Tween-20减少具体产生。

2.pH靠近蛋白的 等电点 ,可根据软件计算入VECTOR NTI计算其理论等电点,尽量纯化的溶剂在远离等电点。

3.蛋白浓度过大,调节纯化时蛋白的浓度即可,如果需要高浓度蛋白,用超滤或 冷冻干燥 浓缩即可。

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